犬狂犬病毒抗體檢測試劑盒使用說明書 

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【原理】

本試劑盒采用酶聯免疫方法（ELISA）檢測犬血清中的特異性抗狂犬病毒抗體，用于犬只免疫后抗體監測。

【試劑組成】

【操作程序】

1.  酶結合物工作液配制：取1支酶結合物原液全部加入到1支酶結合物稀釋液中，充分混勻即可使用。

2.  洗滌液配制：每袋PBST干粉用蒸餾水500ml溶解混勻，即為洗滌液。

3.  加樣反應：每孔滴加樣品稀釋液2滴，加待檢樣品各5ul。每次試驗需設陰性對照、臨界對照各2孔，空白孔1孔 （陰性對照、臨界對照已稀釋，試驗時可直接取100ul加入孔內，空白孔僅加2滴樣品稀釋液）。放置37℃20分鐘。傾去孔內液體，將已配制好的洗滌液加滿每孔并靜置30秒鐘，傾去，甩干；共洗滌5次，拍干。

4.  加酶反應：除空白對照孔外，其余每孔加已稀釋的酶結合物2滴，置37℃ 20分鐘。然后如上洗滌。

5.  顯色反應：加底物（3號液）和顯色劑（4號液）各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號液）1滴，混勻，終止反應后判讀結果。

【結果判斷】

以空白對照調零，用酶標儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度（A值）。A值≥臨界對照均值為陽性，說明待檢樣品的抗體濃度≥0.5IU/ ml；低于者說明待檢樣品的抗體濃度<0.5IU/ml。

【注意事項】

1.試劑盒于2-8℃保存，有效期6個月。每次使用前應先平衡至室溫。

2.未使用完的板條應密封保存。已稀釋的酶結合物工作液應盡快使用。

3.試劑盒中終止液具有腐蝕性，要小心使用。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗樣本應為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應視為傳染源妥善處理。

6.37℃孵育時，建議使用水浴箱。如無條件，可在溫箱中放置濕盒進行反應并同時用不干膠膜封蓋板孔。

特別提示：在使用酶結合物工作液之前，應確保酶結合物原液已加入酶結合物稀釋液中并混勻！請在工作液瓶簽上注明配置時間。

【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
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