Panbio登革熱IgM 捕獲ELISA法

廣州健侖生物科技有限公司

Panbio登革熱IgM 捕獲ELISA法 原理：IgM群血清抗體和粘附在微孔測試板聚笨乙烯表面上的抗人IgM抗體相結合。用抗原稀釋液把登革熱1~4號抗原濃縮液稀釋到恰當的工作容量。抗原由昆蟲細胞表達系統和一種免疫純化的單克隆抗體制得而成。在稀釋抗原中加入適量的辣根過氧化物酶（HRP）結合單克隆抗體（MAb）形成抗原-MAb復合物。洗去測試板內的殘存血清，加入抗原-MAb復合物。孵育后，洗滌微孔板，加入無色底物，四甲基聯苯胺/過氧化氫（TMB/H2O2）。底物被酶水解后變成藍色。加酸終止反應后，TMB變成黃色。顏色的變化表明測試樣本中有抗登革熱IgM抗體。

用于體外診斷用

(i) 用在準備對照時的所有人類來源的材料在測試對人類缺陷性病毒1和2（HIV1和2）、丙型肝炎病毒以及乙型肝炎病毒表面抗原抗體時，都為陰性。但是沒有哪種方法能夠*保證，所以所有的人體對照和抗原都應該認為是潛在的感染源。疾病預防控制中心和國家健康署建議可能傳染的抗原應該在2級生物安全下進行處理。

(ii) 這種測試只能用血清。用全血、血漿或是其它的樣本間質不能做。

(iii) 黃疸的或黃體脂蛋白血清，或表現出溶血的，或有細菌生長的血清都不可用。

(iv) 不要加熱失活的血清。

(v) 在開始實驗前，所有的試劑必須要平衡至室溫（20~25ºC）。試驗受到室溫變化的影響。只有達到了室溫才能把微孔板從密封包里拿出來。

(vi) 用干凈的槍頭直接在瓶子里配試劑。轉移試劑可能會導致污染。

(vii) 未用過的微孔板，應立即重新封存，并儲存有干燥劑的地方。如果不這樣做可能會造成錯誤的結果。

(viii) 底物系統

(a) 由于TMB易受金屬離子污染影響,所以不允許底物系統和金屬表面接觸。

(b) 避免長時間暴露于陽光直射下。

(c) 一些洗滌劑可能會干擾TMB的表現。

(d) TMB可能會有一些淡藍色。這個不會影響底物的活性或者試驗的結果。

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